خرید و دانلود نسخه کامل مقاله درمورد پزشکی

مقاله درمورد پزشکی

سیتوکسینی به نام فاکتور نکروز دهنده  [1] و ژن کننده گلوتاتیون – S ترانسفراز M1  (GST-M10[2] بودو طبق این بررسی، هیچ ارتباط خاصی برای آللهای GST-M1 با عمل ریوی یافت شد ولی بیان بیشتر آلل  با عمل ریوی بدتر همراه بود.

همجچنین ارتباط ژن TGF-B1 با عمل ریوی بررسی شده است TGF-B1 نوعی سیتوکین با اثرات متنوع می باشد، که در پیش فیبروزی کردن و واکنشهای التهابی [] نقش دارد. آللی از این ژن که با بیان TGF-B1 همراه است نسبت به آللهایی با بیان کم منجر به کاهش سریعتر عمل ریوی می شود [].

تشخیص

عموماً تشخیص cf بر اساس شواهد بالینی و شواهی که نشان دهنده غیر طبیعی بودن عمل کانال CFTR است می باشد.

تشخیص براساس شواهد بالینی: در این روش از علائم بالینی CF جهت تشخیص بیماری استفاده می شود. این علائم در بخش بالینی CF توضیح داده شدند.

تستهای تشخیصی جهت تعیین غیرطبیعی بودن کانال CFTR

این تستها شامل تست اندازه گییر کلر عرق، تست کاندازه گیری اختلاف پتانسیل غشای سلول اپی تلیال، تست اندازه گیری ترتریپینوژن ایمنوراکتیو، کشت خلط، بررسی های رادیولوژی و تستهای ژنتیکی – مولکولی می باشند.

تست اندازه گیری کلر در عرق: افزایش کلر عرق در بیماران CF، اولین بار در قرن بیستم به عنمان شاخص اولیه تشخیص CF شد. دقت اندازه گیری کلر عرق، 90 درصد بوده و در 10 درصد موارد مثبت و منفی کاذب می باشد. در این روش که حداقل حدود 100 میلی گرم عرق بایستی جمع آوری گردد، در صورتی که مقدار کلر عرق بیش از 60MM باشد، فرد به عنوان بیمار شناسایی می شود [ ]

اندازه گیری کلر عرق به دو روش زیر انجام می گیرد:

1. تست غربالگری: در این روش بعد از شستشوی کف دست و خشک کردن آن، دست را برروی کاغذ فیلتر آغشته به نیترات نقره و مرطوب قرار می دهند. هنگامی که کلر زیاد با نیترات نقرع ترکیب شود و روی کاغذ اثر سفیدرنگ تشکیل دهد، نتیجه مثبت است.
2. تست یونوفورز پیلوکارپین:[3] دراین روش الکترودهایی روی پوست ساعد دست قرار داده می شود تا یک جریان الکتریکی بریا انتقال پیلوکارپین (یک داروی محرک) به داخل پوست به منظور القای تعریق، ایجاد شود. سپس عرق جمع آوری و وزن شده و کلر آن اندازه گیری می شود [].
3. معمولاً یک تست غربالگری مثبت با انجام تست یونوفورز معتبر می شود. چرا که سطح کلر در کف دست بالاتر از جاهیا دیگر بدن می باشد [].

تست اندازه گیری اختلاف پتانسیل غشای سلول اپی تلیال (NPD):[4]

فقدان کانال CFTR فعال  در سطح رائی سلولهای اپی تلیال با تغییر در انتقال کلروسدیم همراه بوده و منجر به اختلاف پتانسیل الکتریکی غیرطبیعی در غشاء می شود. اختلاف پتانسیل منفی تر در بیماران نشان دهنده جذب بیشتر سدیم به داخل سلول و عدم ترشح یون کلر به خارج می باشد.

به علاوه راه دیگر تسخیر از طرق اختلاف پتانسیل الکتریکی غشای سلولهای اپی تلیال، تزریق آمیلورید می باشد. در هنگام تزریق این ماده که یک مهارکننده فعالیت کانال سدیم است به افراد بیمار، تغییرتات بیشتری در اختلاف پتانسیل الکتریکی سلولهای اپی تلیال نسبت به افراد سالم دیده یم شود.

از NPD برای تأیید تشخیص CF، به هنگامی که فردی دارای علائم CF است ولی تست عرق منفی دارد و از طرفی تشخیص دو جهش مسبب بیماری با استفاده از روش های ژنتیکی – مولکولی امکان پذیر نیست استافده یم شود [].

تست اندازه گیری تریپسینوژن (IRT)[5] (تست غربالگری نوزادان)[6]: غربالگری نوزادان در برخی کشورها با استفاده از بررسی میزان تریپ سینوژن  ایمنوراکتیو خون انجام می گیرد. زیرا تولید عرق در نوزادان کم بوده و جمع آوری آن مشکل است []. در این روش 2 تا 3 روز بعد از تولد نوزاد، مقداری خون از پاشنه او گرفته و میزان پروتئین تریپسنوژن را اندازه گیری می کنند. در صورتی که مقدار این پروتئین در خون افزایش یابد تست مثبت است و نوزاد بایستی بعد از سن دو ماهگی با روش ژنتیکی – مولکولی و یا تست عرق مورد بررسی بیشتر قرار گیرد [].

کشت خلط:[7] این تست نیز در بعضی بیماران مشکوک به CF انجام می گیرد. در این روش خلط بیمار از لحاظ وجود باکتریهیا مختلف مانند پودوموناس آئروجینوزا بررسی می شود [].

بررسی های رادیولوژی: در بررسی های رادیولوژی بیماران CF، بزرگ شدن قفسه، برونشیت و تراکم موکوس دیده می شود. در صورتی که در افراد سالم قفسه سینه طبیعی می باشد [].

تشخیص بر اساس تستهای ژنتیکی – مولکولی: این تستها شامل آنالیز مستقیم DNA می باشد که قادر به تشخیص همه جهش های شناخته شده ژن CFTR نیستند. همچنین در این روش ها برخی جهش هایی که تا کنون شناخته نشده اند، قابل تشخیص نمی باشند []. با این وجود به دلیل عدم درمان قطعی CF و برای اطمینان از نتایج بدست‌آمده از تستهایی که قبلاً ذکر شد، تست های ژنتیکی-مولکولی امروزه کاربرد وسیعی در تشخیص جهش های CFTR دارند. شناسایی این جهش ها، جهت تشخیص پیش از تولد CF و مشاوره ژنتیکی در خانواده های در معرض خطر و همچنین برای یافتن ارتباط ژنوتیپ – فنوتیپ مفید می باشد []

انواع روش های ژنتیکی – مولکولی درتشخیص CF

روش های مولکولی در تشخیص CF

روش های مولکولی تعیین جهش دو هدف عمده را دنبال می کنند. 1. تعیین جهش های شناخته شده که در آنها نوع و محل جهش مشخص است 2. بررسی و جستجوی دقیق در طول اگزونها و ژنهای شناخته شده برای هر نوع جهش.

در مورد تعیین جهش های شناخته شده روش های مختلفی وجود دارد. چندین روش آنزیمی بر پایه استفاده از پلی مرازها و یا واکنش های اتصالی، برای تعیین جهش های خاص به میزان زیادی استفاده می رود که می توان به RFLP، ASO[8] 0ایگونولکئوتید آلل مخصوص)، ARMS[9](تکثیر اختصاصی آلل)، OLA[10] اشاره نمود.

RFIP: اساس این روشش استفاده از آنزیم های محدودالاثر[11] است. این انزیم ها دارای توالی های تشخیص مخصوص[12] در DNA جهت برش می باشند. در نتیجه تغییرات ژنومی منجر به تولید و یا از بین بردن مکانهای برش می شوند. به این تغییرات DNA که در مکانهای برش آنزیمی ایجاد می شوند RFIP گویند. تغییر اندازه یک یا تعداد بیشتری از قطعات DNA بعد از ساترن بلات و هیبریداسیون با پر.ب DNA مشخص خواهد شد [].

ASO: در نوعی از این روش که لکه گذاری نقطه ای[13] نامیده می شود، یک جفت الیگونوکلئوتید آلل مخصوص که با مواد رادیواکتیو فلورسنت نشاندار شده اند (پروب)، طراحی می شدند به صورتی که هر یک از این الیگونوکلئوتیدها به طور اختصاصی با آلل نرمال یا جهش یافته هیبرید می شوند. DNA مورد نظر که از لحاظ جهش بررسی می شود نیز بایستی در قسمتی که جهش مورد نظر ما را در بر می گیرد توسط PCR تکثیر شود و سپس این DNA برروی غشاهای

مقاله درمورد پزشکی